竞赛项目三：紫外-可见分光光度法测定未知物

1．紫外可见分光光度计(UV-1801)；配1cm石英比色皿2个；

2．容量瓶：50mL  10个；

3．吸量管：5mL， 4支；

4．烧杯：  100mL  4个；

1．标准溶液：任选3种标准试剂溶液（水杨酸、磺基水杨酸、1,10-邻菲啰啉、苯甲酸）

2．未知液：3种标准溶液中的任何一种。

1．吸收池配套性检查

石英吸收池在220nm装蒸馏水，以一个吸收池为参比，调节τ为100%，测定其余吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。

2．未知物的定性分析

将四种标准试剂溶液和未知液配制成约为一定浓度的溶液。以蒸馏水为参比，于波长200～350nm范围内测定溶液吸光度，并作吸收曲线。根据吸收曲线的形状确定未知物，并从曲线上确定最大吸收波长作为定量测定时的测量波长。190～210nm处的波长不能选择为最大吸收波长。

3. 标准工作曲线绘制

分别准确移取一定体积的标准溶液于所选用的100mL容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻线，摇匀。根据未知液吸收曲线上最大吸收波长，以蒸馏水为参比，测定吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准工作曲线。

4．未知物的定量分析

确定未知液的稀释倍数，并配制待测溶液于所选用的100mL容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻线，摇匀。根据未知液吸收曲线上最大吸收波长，以蒸馏水为参比，测定吸光度。根据待测溶液的吸光度，确定未知样品的浓度。未知样平行测定3次。

根据未知溶液的稀释倍数，求出未知物的含量。

计算公式： C0=cx*n

co——原始未知溶液浓度，μg/mL；

cx——查出的未知溶液浓度，μg/mL；

n——未知溶液的稀释倍数。